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高尿酸血症模型

时间:2021-09-29浏览次数:2727

高尿酸血症氧嗪酸钾诱导的高尿酸血症大/小鼠
次黄嘌呤致小鼠高尿酸血症小鼠
腺嘌呤+乙胺丁醇致大鼠高尿酸血症大鼠


临床上高尿酸血症(hyperuricemia)是指机体细胞外液的尿酸盐呈超饱和状态,高尿酸血症患者的血尿酸盐通常超过417μmol/L,其发生机制主要为尿酸生成增多或肾脏尿酸排泄减少。超高蛋白膳食是引起机体嘌呤代谢紊乱的重要原因,过量糖类、脂肪、蛋白质、盐的摄入及大量饮酒与本病发病率增加密切相关。5%~12%的高尿酸血症患者会发展成为痛风,痛风不仅可以侵犯患者的骨和关节,而且还容易累及肾脏和心血管系统。高尿酸血症及原发性痛风与人类肥胖症、高脂血症、高血压、糖尿病、动脉粥样硬化等疾病呈显著正相关,高尿酸血症也是机体发生动脉粥样硬化的危险因素之一;同时心脑血管疾病伴发高尿酸血症的患者常易诱发急性心肌梗死、卒中,使这些疾病的发病率和病死率增高。因此,痛风和糖尿病一样,也是危害人类健康的一种严重的代谢性疾病。目前,国内外高尿酸血症模型的复制方法主要有:①给予模型动物饲喂、注射次黄嘌呤。②用氧嗪酸抑制大鼠或小鼠尿酸酶活性。③通过胚胎干细胞同源性重组,破坏小鼠尿酸酶基因(EC1171313),再用基因重组法获得尿酸酶缺乏的突变小鼠,制成高尿酸血症模型小鼠。

1 大鼠高尿酸血症模型

(1)复制方法 
体重约200g成年雄性大鼠,分别以200mg/kg体重、250mg/kg体重的剂量给大鼠灌服腺嘌呤加乙胺丁醇,每天灌服1次;200mg/(kg·d)为中剂量,250mg/(kg·d)为高剂量;中、高剂量大鼠于给药第7, 14, 21日时血尿酸水平均可升高。

(2)模型特点  
增加模型动物体内尿酸、尿酸前体(次黄嘌呤、黄嘌呤)的量,或抑制肾小管尿酸的分泌均可引起机体血尿酸水平升高。大剂量给予尿酸或尿酸前体来提高大鼠血尿酸水平为目前复制大鼠高尿酸血症模型的主要方法,有些是在前者的基础上联合抑制尿酸排泄药(乙胺丁醇、烟酸等)或尿酸酶抑制剂(oxonic acid)。上述腺嘌呤法运用最多,通常采用饲料喂养和灌胃两种途径,但是饲料喂养由于动物个体差异,导致摄入药物量不均而造成模型动物血尿酸变化不均一。而经口灌服腺嘌呤加乙胺丁醇造模则药量容易控制,模型动物血尿酸变化比较稳定。模型制作过程中乙胺丁醇的应用可增加尿酸在动物体内的蓄积,使模型效果更为理想。本模型制作方法简单,形成高尿酸血症时间较短,效果显著。

(3)比较医学  
临床上高尿酸血症是由于尿酸产生过多和/或肾脏排泄尿酸减少所致的疾病。由于啮齿类动物体内尿酸代谢与人类有很大差异,这些动物体内的尿酸可以继续通过尿酸酶等进一步分解成为尿囊素。而人则缺乏尿酸酶,大部分以尿酸形式从尿中排出。虽然存在上述差异,但目前啮齿类动物仍被广泛用于高尿酸血症的模型制作和研究。大鼠高尿酸血症时常导致其肾功能损害,因此多用于复制高尿酸血症肾病模型,观察高尿酸血症时机体肾脏、脾脏的病理变化。而小鼠则常用于单纯高尿酸血症模型的建立,或合并其他疾病如高脂血症、尿酸性肾病等模型的研究。


2 小鼠高尿酸血症模型

1.次黄嘿呤高尿酸血症小鼠模型

(1)复制方法  
体重约为20g的KM小鼠,按1000mg/kg体重的剂量一次性经腹腔注射次黄嘌呤(hypoxanthine),注射后分别于预定时间采血作血尿酸测定。

(2)模型特点  
经腹腔注射次黄嘌呤后0.5h,模型小鼠血清尿酸值达到高峰,至6h后血清尿酸值可降低到一半,但仍接近高尿酸血症的临床诊断标准。与正常对照动物相比,模型动物血清尿酸值明显升高并可持续24h。其中0.5~1h期间,尿值已超过血清尿酸值的饱和浓度。当采用低于1000mg/kg体重剂量的次黄嘌呤剂量造模时,则不但不能显著升高血清尿酸值,反而会导致血尿酸降低,原因可能是激活机体代谢酶系统或肾脏代偿功能加强所致。模型制作方法简单,成模时间短,模型表现较稳定。

(3)比较医学  
由于人类高尿酸血症病因复杂,影响因素多,形成时间长,因此制备相应的动物模型较困难。高尿酸血症患者除表现为尿酸排泄减少外,常伴有机体嘌呤代谢紊乱。本模型采用直接注射生成尿酸的前体物质——次黄嘌呤的方法,可以较简便地建立稳定性较好的高尿酸血症动物模型。模型适用于抗高尿酸血症药物治疗和药物筛选方面的研究。

2.氧嗪酸钾盐高尿酸血症小鼠模型

(1)复制方法  
体重约为28g的雄性KM小鼠,按300mg/kg体重的剂量经腹腔注射氧嗪酸钾盐,注射后2h后其血尿酸水平明显升高,与正常对照对比有显著差异(P<0.001)。

(2)模型特点  
本模型制作方法简便,短时间内就可造成血尿酸升高,重复性好,但模型小鼠形成的高尿酸血症仅能维持5h,也存在时效性。本模型在国际上使用较为普遍,通常用于抗高尿酸血症和痛风药物治疗作用的评价。

(3)比较医学  
高尿酸血症时机体出现尿酸生成增多或肾脏尿酸排泄减少。本模型使用的氧嗪酸(oxonic acid),是一种化学尿酸酶抑制剂,它可抑制模型小鼠体内的尿酸酶活性,使动物体内的尿酸不能分解,从而造成机体内血清尿酸生成增多,最后形成高尿酸血症动物模型。本模型的造模机制、高尿酸血症的发生时间和维持时间,与腺嘌呤造成的高尿酸血症动物模型明显不同,后者主要是采取增加动物体内的尿酸含量造模,同时高尿酸血症的维持时间也较长。


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可以买球赛的软件·(中国)公司官方网站实验服务项目

动物实验细胞生物学病理实验
消化系统模型细胞培养病理染色
胃酸分泌模型普通细胞株HE染色
脓毒症模型细胞缺氧培养油红O染色
胃溃疡模型细胞培养+支架番红固绿染色
胰腺炎模型干细胞培养Masson染色
肝纤维化模型原代细胞分离/提取/培养天狼猩红染色
DIO肥胖模型细胞转染/病毒感染PAS糖原染色
胆结石模型Trans well共培养阿利新蓝染色
结肠炎(UC)模型细胞增殖甲苯胺蓝染色
脂肪肝模型细胞计数尼氏染色
急性肝损伤模型生长曲线测定LFB髓鞘染色
免疫、代谢系统疾病模型存活曲线测定普鲁士蓝染色
骨质疏松模型ccK-8增殖检测VG染色
糖尿病模型MTT增殖检测EVG染色
高尿酸血症模型CFSE检测增殖-流式检测VonKossa染色
呼吸系统模型BrDU检测-免疫荧光法刚果红染色
肺纤维化模型细胞凋亡苏丹黑B染色
慢性肺阻塞模型Annexin V/PI流式检测细胞凋亡Trap染色
急性肺损伤模型WB检测凋亡相关蛋白抗酸染色
哮喘模型透射电镜观察凋亡小体革兰氏染色
肺栓塞模型Tunel染色(POD法,DAB显色)AB-PAS染色
支气管炎模型Tunel(荧光法,含试剂盒)亚甲基蓝染色
泌尿生殖系统模型DNA ladder法苯胺蓝染色
慢性肾衰模型细胞周期荧光 DAPI染色
急性肾衰模型细胞显微计数普鲁士蓝染色
肾间质纤维化模型PI染色间苯二酚碱性品红染色
肾结石模型BrdU渗入法银染
肾炎模型免疫荧光染色黑色素染色
子宫内膜异位症模型PI流式检测细胞周期镀银染色
心血管系统模型细胞运动PASM 六胺银染色
冠心病模型Transwell检测细胞迁移VG染色
心肌梗死模型Transwell检测细胞侵袭富尔根染色
心脏骤停模型细胞划痕亚甲基蓝染色
慢性心力衰竭模型细胞克隆碘-碘化钾染色
动脉粥样硬化模型集落形成法/稀释铺板方法Goldner三色法染色
白血病模型软琼脂克隆法PAS-萘酚磺S染色
高血压模型毛细管克隆法改良苯酚品红染色
神经系统模型体外实验血管生成网状纤维染色
脑卒中模型磁珠分选细胞β-半乳糖苷酶染色
栓塞性脑梗死模型流式分选细胞镀银染色
脑出血模型开机费movat五色染色
脑损伤模型单色维多利亚蓝染色
脊髓损伤模型双色免疫组化
帕金森模型CBA多细胞因子流式检测免疫组化预式
老年痴呆模型组织/血液细胞制备免疫组化正式
应激模型组织单细胞制备免疫荧光(石蜡-单标)
骨骼疾病模型中性粒细胞提取免疫荧光(石蜡-双标)
骨折模型其他样本细胞制备(如血液等)免疫荧光(石蜡-三标)
骨缺损模型外周血PBMC分离免疫荧光(冰冻-单标)
风湿免疫性关节炎模型线粒体组学免疫荧光(冰冻-双标)
骨关节炎模型线粒体膜电位检测-流式法制片前处理
五官疾病模型线粒体膜电位检测-免疫荧光法石蜡组织包埋
眼科疾病模型线粒体ROS生物含量检测--流式特殊包埋(细胞、材料、眼球等)
鼻腔疾病模型线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等)
皮肤疾病模型线粒体通透性转换孔(mPTP)骨组织脱钙(小)
皮肤损伤模型溶酶体免疫荧光法骨组织脱钙(大)
肿瘤疾病模型线粒体+溶酶体共定位骨组织EDTA脱钙(小)
原位瘤模型内质网骨组织EDTA脱钙(大)
转移瘤模型线粒体钙瞬时变化检测-流式石蜡白片
皮下植瘤模型ATP检测细胞爬片

ADP检测

AMP检测



流式DNA/RNA半定量检测基因编辑工具
组织细胞悬液处理pcr检测mRNA合成(3保1)片段/质粒/引物合成
细胞处理microRNA检测质粒载体构建
血液标本处理LncRNA表达量的检测过表达腺病毒载体构建包装
细胞刺激培养CirRNA表达量的检测shRNA腺病毒载体构建包装
单色检测凝胶电泳过表达慢病毒载体构建包装
双色检测基因合成shRNA慢病毒载体构建包装
Annexin V/PI凋亡<300过表达腺相关病毒载体构建包装
细胞周期300-1,500shRNA腺病毒载体构建包装

1500 - 5000稳转细胞株

>5000

特殊序列



ELISAWBqPCR
组织匀浆处理蛋白提取及定量一RNA抽提
ELISA(不含试剂盒)48T/kitWB检测一(10孔膜/指标)mRNA引物设计及合成
ELISA(不含试剂盒)96T/kit灰度值分析及作图一(10孔膜/指标)miRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)48T/kit蛋白提取及定量二LncRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)96T/kitWB检测二(10孔膜/指标)CircRNA引物设计及合成

灰度值分析及作图二(10孔膜/指标)mRNA RT-qPCR


miRNA RT-qPCR


LncRNA RT-qPCR


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