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老年痴呆模型

时间:2021-09-29浏览次数:779

老年痴呆AD阿尔兹海默症模型大/小鼠
血管性痴呆模型大鼠


AD阿尔兹海默症模型
原型物种:

来源:物理方法和药物

模式动物品系:SPF级SD大鼠,健康,雄性,体重为250g-300g。

实验分组:正常对照组、模型组、阳性药组、受试药组三个剂量组。

实验周期:4-6 weeks

建模方法
SD大鼠均采用1%戊巴Bi妥钠40μg/g腹腔内注射麻醉,麻醉后继而固定于脑立体定位仪上。按照大鼠脑立体定位图谱,以前囟为零起点,前囟后3.5 mm处为穿刺点,中线右侧旁开2mm,而后牙科钻钻开颅骨,采用微量注射器自脑表面垂直进针3mm,即:(AP= -3.5 mm, ML=2.0 mm, DV=3.0 mm),双侧海马CA1区缓慢匀速注射Aβ1-40各10 μg (1 μL),留针5 min,退针后缝合伤口。造模后3d后,开始尾静脉注射,注射生理盐水,大鼠每只给药100μl/次/d,连续给药21d后,进行水迷宫行为学检测。



模型评价
行为学检测:所有组别,于给药后21d,进行Morris水迷宫试验,试验分为定位航行实验和空间探索实验。
1. 定位航行实验:大鼠连续接受5天的训练,每天4次,每次时间间隔30min,记录下大鼠从4个入水点和入水并找到平台所需要的时间,即逃避潜伏期。4次潜伏期的平均成绩作为当日的最终结果进入到最后统计。
2. 空间探索实验:实验的第6天,撤去平台,从距离平台的最远端入水后,将大鼠放入水中,记录下30s内大鼠的游泳轨迹,并观察分析大鼠在目标象限的停留时间,以及它的穿越平台的次数。
行为学结束后,将各组大鼠摘取全脑,冰上剥去小脑,将剩余部分左右对切,一半放入4%多聚 J 醛中固定,用于病理学检测。另一半取海马用于PCR和蛋白检测。



组织病理学
1. 尼氏染色海马组织固定后石蜡切片,进行尼氏染色,观察海马区神经细胞形态和数量。光学显微镜下,计数视野下每组大鼠同一部位的神经元数量,作统计分析。
2. 免疫荧光染色免疫荧光染色,观察海马区Aβ1-40染色情况。荧光显微镜下,计数视野下每组大鼠同一部位的阳性斑块数量,作统计分析。
3. TUNEL染色海马组织进行TUNEL染色,观察神经元凋亡情况。荧学显微镜下,计数视野下每组大鼠同一部位的阳性染色数量,作统计分析。

标志因子水平
1. RT-qPCR检测收集海马组织,提取RNA,反转录cDNA,PCR检测caspase-3,Bcl-2和Bax的表达。
2. Western-blot检测收集海马组织蛋白,检测active-caspase-3,Bcl-2和Bax的蛋白表达。

血管性痴呆模型
永久性结扎双侧颈总动脉大鼠于实验前 12 h 开始禁食,不禁水。 麻醉后将大鼠固定于实验台上,消毒后沿颈正中线切开皮肤约 4~5 cm,暴露并分离出双侧颈总动脉,此时需注意避免损伤迷走神经,永久性结扎双侧颈总动脉。 若有对照组,则对照组大鼠只分离双侧颈总动脉而 不 结 扎, 术 后 缝 合 皮 肤、 消 毒 并 应 用 抗 生素。 有研究将此法改良为分次进行的永久性结扎双侧颈总动脉,即先结扎一侧颈总动脉,3 ~ 7 d后再行结扎对侧颈总动脉。 由于大鼠侧支循环具有个体差异性,因此结扎颈总动脉后所造成的卒中严重程度不同,脑血流量严重不足时可导致大鼠死亡。 改良后的手术方法结扎一侧颈总动脉后通过大脑侧支循环逐步代偿后再行结扎对侧颈总动脉,不至于使脑血流量骤然减少导致大鼠死亡。 该方法提高了大鼠存活率,但目前应用较少,还需重复验证该方法的稳定性及可靠性。

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可以买球赛的软件·(中国)公司官方网站实验服务项目

动物实验细胞生物学病理实验
消化系统模型细胞培养病理染色
胃酸分泌模型普通细胞株HE染色
脓毒症模型细胞缺氧培养油红O染色
胃溃疡模型细胞培养+支架番红固绿染色
胰腺炎模型干细胞培养Masson染色
肝纤维化模型原代细胞分离/提取/培养天狼猩红染色
DIO肥胖模型细胞转染/病毒感染PAS糖原染色
胆结石模型Trans well共培养阿利新蓝染色
结肠炎(UC)模型细胞增殖甲苯胺蓝染色
脂肪肝模型细胞计数尼氏染色
急性肝损伤模型生长曲线测定LFB髓鞘染色
免疫、代谢系统疾病模型存活曲线测定普鲁士蓝染色
骨质疏松模型ccK-8增殖检测VG染色
糖尿病模型MTT增殖检测EVG染色
高尿酸血症模型CFSE检测增殖-流式检测VonKossa染色
呼吸系统模型BrDU检测-免疫荧光法刚果红染色
肺纤维化模型细胞凋亡苏丹黑B染色
慢性肺阻塞模型Annexin V/PI流式检测细胞凋亡Trap染色
急性肺损伤模型WB检测凋亡相关蛋白抗酸染色
哮喘模型透射电镜观察凋亡小体革兰氏染色
肺栓塞模型Tunel染色(POD法,DAB显色)AB-PAS染色
支气管炎模型Tunel(荧光法,含试剂盒)亚甲基蓝染色
泌尿生殖系统模型DNA ladder法苯胺蓝染色
慢性肾衰模型细胞周期荧光 DAPI染色
急性肾衰模型细胞显微计数普鲁士蓝染色
肾间质纤维化模型PI染色间苯二酚碱性品红染色
肾结石模型BrdU渗入法银染
肾炎模型免疫荧光染色黑色素染色
子宫内膜异位症模型PI流式检测细胞周期镀银染色
心血管系统模型细胞运动PASM 六胺银染色
冠心病模型Transwell检测细胞迁移VG染色
心肌梗死模型Transwell检测细胞侵袭富尔根染色
心脏骤停模型细胞划痕亚甲基蓝染色
慢性心力衰竭模型细胞克隆碘-碘化钾染色
动脉粥样硬化模型集落形成法/稀释铺板方法Goldner三色法染色
白血病模型软琼脂克隆法PAS-萘酚磺S染色
高血压模型毛细管克隆法改良苯酚品红染色
神经系统模型体外实验血管生成网状纤维染色
脑卒中模型磁珠分选细胞β-半乳糖苷酶染色
栓塞性脑梗死模型流式分选细胞镀银染色
脑出血模型开机费movat五色染色
脑损伤模型单色维多利亚蓝染色
脊髓损伤模型双色免疫组化
帕金森模型CBA多细胞因子流式检测免疫组化预式
老年痴呆模型组织/血液细胞制备免疫组化正式
应激模型组织单细胞制备免疫荧光(石蜡-单标)
骨骼疾病模型中性粒细胞提取免疫荧光(石蜡-双标)
骨折模型其他样本细胞制备(如血液等)免疫荧光(石蜡-三标)
骨缺损模型外周血PBMC分离免疫荧光(冰冻-单标)
风湿免疫性关节炎模型线粒体组学免疫荧光(冰冻-双标)
骨关节炎模型线粒体膜电位检测-流式法制片前处理
五官疾病模型线粒体膜电位检测-免疫荧光法石蜡组织包埋
眼科疾病模型线粒体ROS生物含量检测--流式特殊包埋(细胞、材料、眼球等)
鼻腔疾病模型线粒体ROS生物含量检测--免疫荧光软化(肝硬化、皮肤结痂、植物等)
皮肤疾病模型线粒体通透性转换孔(mPTP)骨组织脱钙(小)
皮肤损伤模型溶酶体免疫荧光法骨组织脱钙(大)
肿瘤疾病模型线粒体+溶酶体共定位骨组织EDTA脱钙(小)
原位瘤模型内质网骨组织EDTA脱钙(大)
转移瘤模型线粒体钙瞬时变化检测-流式石蜡白片
皮下植瘤模型ATP检测细胞爬片

ADP检测

AMP检测



流式DNA/RNA半定量检测基因编辑工具
组织细胞悬液处理pcr检测mRNA合成(3保1)片段/质粒/引物合成
细胞处理microRNA检测质粒载体构建
血液标本处理LncRNA表达量的检测过表达腺病毒载体构建包装
细胞刺激培养CirRNA表达量的检测shRNA腺病毒载体构建包装
单色检测凝胶电泳过表达慢病毒载体构建包装
双色检测基因合成shRNA慢病毒载体构建包装
Annexin V/PI凋亡<300过表达腺相关病毒载体构建包装
细胞周期300-1,500shRNA腺病毒载体构建包装

1500 - 5000稳转细胞株

>5000

特殊序列



ELISAWBqPCR
组织匀浆处理蛋白提取及定量一RNA抽提
ELISA(不含试剂盒)48T/kitWB检测一(10孔膜/指标)mRNA引物设计及合成
ELISA(不含试剂盒)96T/kit灰度值分析及作图一(10孔膜/指标)miRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)48T/kit蛋白提取及定量二LncRNA引物设计及合成
ELISA(含国产试剂盒)96T/kitWB检测二(10孔膜/指标)CircRNA引物设计及合成

灰度值分析及作图二(10孔膜/指标)mRNA RT-qPCR


miRNA RT-qPCR


LncRNA RT-qPCR


CircRNA RT-qPCR



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